氧化型谷胱甘肽（GSSG）测定试剂盒（快速）

检测意义：

谷胱甘肽（GSH）是一种硫醇（SH）化合物，它广泛存在于动物组织、植物组织、微生物和酵母中，总谷胱甘肽（T-GSH）包含谷胱甘肽还原型（G-SH）和氧化型（G-S-S-G）两种形式，氧化型谷胱甘肽是分子式为C20H32N6O12S2的物质。

谷胱甘肽（glutathione，r-glutamyl cysteingl +glycine，GSH）是一种含γ-酰胺键和巯基的三肽，由谷氨酸、半胱氨酸及甘氨酸组成，存在于几乎身体的每一个细胞 。谷胱甘肽能帮助保持正常的免疫系统功能，并具有抗氧化作用、整合解毒作用 。半胱氨酸上的巯基为其活性基团（故常简写为G-SH），易与某些药物、毒素等结合，使其具有整合解毒作用 。谷胱甘肽不仅可用于药物，更可作为功能性食品的基料，在延缓衰老、增强免疫力、抗肿瘤等功能性食品广泛应用。 

试剂盒组分: （保存温度4℃）

本试剂盒可用于检测细胞、组织、血浆、血清、红血球、植物等样品。

等。

标本收集与试剂准备:

1. 血清、血浆样本收集：应使用一次性的无热原，无内毒素试管（EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝均可），血清、血浆避免使用溶血，高血脂标本，标本悬浮物应离心去除，使标本清澈透明。细胞培养液、上清样品收集：取细胞培养上清液500ul，4度，6000rpm离心5-10min；取上清。 组织样品收集：将组织块用PBS漂洗干净，制成匀浆液，4 度离心(3500r/min, 30min) 取上清液。待测样本应尽早检测，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-80℃）保存，避免反复冻融。

2. 标准品/样品稀释液（1×）的配置：1ml标准品/样品稀释液（10×）+9ml去离子水。

3. 标准品配制：取8个1.5ml离心管，分别标注S1,S2,S3,S4,S5,S6,S7, blank,每管中各加入标准品/样品稀释液（1×）100ul，第一管S1中再加入标准品（5mg/ml）100ul，置于漩涡混合器上混匀后用加样器吸100ul，移至第二管，如此反复作对倍稀释，从第七管（S7）中吸出100ul弃去，第八管为空白对照。标准曲线浓度为: 2500、1250、625、312.5、156.2、78.1、39、0 ug/ml。

4. 样品的准备：取和检测样品相同数量的1.5ml离心管并编号，每管中分别加入对应检测样品100ul。

5. 如果您检测的样本中靶蛋白浓度高于标准品最高值，建议重新检测，请根据实际情况，适当倍数稀释(建议做预实验，以确定稀释倍数)。

检测程序:

1. 加提取液：将配置/分装好的标准品及待测样品放入1.5ml离心管架（1.5ml双面板）上，每管中分别各                         

加入提取液100ul，震荡混匀后，室温静置10分钟。

2. 加显色液：每孔加入显色液400ul，混匀后室温静置反应10分钟，将反应好的样品，8000转离心1分

钟，取上清100ul对应加入微孔板中，（如检测样品澄清也可以不离心，直接取上清）。

3. 读    数：将反应好的微孔板用酶标仪在412nm处读OD值A1。

4. 加GSH还原酶：在读完数的微孔板中，每孔再加入GSH还原酶100ul，混匀后室温静置反应5分钟。

5. 读    数：将反应好的微孔板用酶标仪在412nm处读OD值A2。

结果判断与计算：

1. 所有OD值建议减除空白孔值后再进行计算，如空白孔OD低于0.1，也可以直接计算。

2. OD值A2-OD值A1，以标准品浓度作横坐标，OD值作纵坐标，手工绘制或用软件绘制标准曲线，根据样品OD值计算出相应含量，再乘以稀释倍数即可。

注意事项

1. 请自备1.5ml离心管及离心管架等常规检测设备及仪器。

2. 检测时所有试剂都要恢复到室温，试剂盒开封后剩余试剂放回袋中1 个月内用完。

3. 实验前请认真仔细阅读此说明书，说明书以试剂盒内纸质版为准。

4. 本试剂盒仅用于科研，不能用于临床诊断！