过氧化物酶（Peroxidase，POD）检测试剂盒（快速）

检测意义：

过氧化物酶（Peroxidase，POD）是氧化还原酶的一种，是过氧化物酶体的标志酶，广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，可催化过氧化氢，氧化酚类和胺类化合物和烃类氧化产物，具有消除过氧化氢和酚类、胺类、醛类、苯类毒性的双重作用，过氧化物酶（Peroxidase，POD）检测对于临床诊断及疾病发展和疗效监控也具有很大的意义。

试剂盒组分: （保存温度4℃）

本试剂盒可用于检测细胞、组织、血浆、血清、红血球、植物等样品。

标本收集与试剂准备:

1. 血清、血浆样本收集：应使用一次性的无热原，无内毒素试管（EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝均可），血清、血浆避免使用溶血，高血脂标本，标本悬浮物应离心去除，使标本清澈透明，收集样品后直接检测，不需要其他处理。

2. 细胞培养液、上清样品收集：取细胞培养上清液500ul，4度，5000rpm离心10分钟，取上清，样品直接检测，不需要其他处理。

3. 细菌/细胞的收集:收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清,按照500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液的比例，用超声波破碎细菌或细胞，5000g 4℃离心15分钟，取上清，置冰上待测。

4.  组织样品收集：将组织块用PBS漂洗干净，称取约 0.1g 组织， 加入1mL提取液，进行冰浴匀浆，5000g 4℃离心 15分钟，取上清，置冰上待测，待测样本应尽早检测，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃以下）保存，避免反复冻融。

5. 标准品/样品稀释液（1×）的配置：1ml标准品/样品稀释液（10×）+9ml去离子水。

6. 显色液的配置：显色液B按1:100加入显色液A中，即完成显色液的配置，显色前10分钟配置。

7. 标准品配制：取8个1.5ml离心管，分别标注S1,S2,S3,S4,S5,S6,S7, blank,每管中各加入标准品/样品稀释液（1×）200ul，第一管S1中再加入标准品（10000U/L）200ul，置于漩涡混合器上混匀后用加样器吸200ul，移至第二管，如此反复作对倍稀释，从第七管（S7）中吸出200ul弃去，第八管为空白对照。标准曲线浓度为:10000、5000、2500、1250、625、312、1560、0  U/L。

8. 如果您检测的样本中靶蛋白浓度高于标准品最高值，建议重新检测，请根据实际情况，适当倍数稀释(建议做预实验，以确定稀释倍数)。

检测程序:

1. 加    样：微孔板中分别对应加入配置好的标准品及待测样品10ul。

2. 加显色液：每孔加入配置好的显色液190ul，室温静置反应10分钟，

3. 读    数：将反应好的微孔板用酶标仪在470nm处读OD值。

结果判断与计算：

1. 测量出OD值后根据标准曲线进行计算。

2. 以标准品浓度作横坐标，OD值作纵坐标，手工绘制或用软件绘制标准曲线，根据样品OD值计算出相应含量，再乘以稀释倍数即可。

注意事项

1. 检测时所有试剂都要恢复到室温，试剂盒开封后剩余试剂放回袋中1 个月内用完。

2. 实验前请认真仔细阅读此说明书，说明书以试剂盒内纸质版为准。

3. 本试剂盒仅用于科研，不能用于临床诊断！